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Apoptose
Die Fähigkeit, das Leben oder Sterben einer Zelle zu modulieren, hat ein enormes therapeutisches Potenzial. Wenn die Apoptose übermäßig gut funktioniert, können zu viele Zellen absterben, was zu schwerwiegenden Gewebeschäden führen kann. Dies ist bei neurodegenerativen Erkrankungen wie Alzheimer, Huntington und Parkinson der Fall. Wenn die Apoptose nicht funktioniert, werden Zellen unsterblich, wie es bei Krebs der Fall ist. Daher wird die Analyse der Zellzyklusmaschinerie und der Signalwege, die den Zellzyklus steuern, umfassend untersucht.
Im folgenden Artikel werden die wichtigsten bei Szabo-Scandic verfügbaren Forschungswerkzeuge zur Apoptose beschrieben.
Während des frühen Stadiums der Apoptose erfolgt der Verlust der Zellmembranasymmetrie. In diesem Stadium findet die Translokation von Phosphatidylserin (PS) statt. Annexin V ist ein Ca2+ abhängiges Phospholipid-bindendes Protein, das eine hohe Affinität für PS hat und zur Identifizierung von Zellen im Frühstadium der Apoptose verwendet werden kann. Unsere Lieferanten Immunostep und GeneTex haben Annexin V Apoptose Detection Kits für die Durchflusszytometrie in verschiedenen Fluorochrom-Varianten entwickelt.
Veränderungen des mitochondrialen Potenzials sind während Nekrose, Zellzyklus und Apoptose beschrieben worden. Die mitochondriale Farbstoffaufnahme ist eine mögliche Quelle für Fluoreszenzvarianz. Die Durchflusszytometrie kann zur Abschätzung des Membranpotenzials in eukaryotischen Zellen verwendet werden. Das Immunostep MitoStep Kit verwendet einen kationischen Farbstoff DilC1.
Apoptose ist das Ergebnis einer Kaskade von molekularen und biochemischen Ereignissen, an denen endogene Endonukleasen beteiligt sind. Diese endogenen Endonukleasen spalten die DNA in die prototypische Leiter von DNA-Fragmenten, welche dann in Agarosegelen sichtbar gemacht werden können.
Exalpha's DNA Fragmentation Detection Kit nutzt die Tatsache aus, dass apoptotische Endonukleasen nicht nur die zelluläre DNA beeinflussen, indem sie die klassische DNA-Leiter produzieren, sondern auch freie 3'-OH-Gruppen an den Enden dieser DNA-Fragmente erzeugen. Diese freien 3'-OH-Gruppen werden durch das DNA-Fragmentation Detection Kit endmarkiert, was den Nachweis apoptotischer Zellen mit Hilfe einer molekularbiologisch basierten Endmarkierungstechnik ermöglicht.
Die Auswertung des Zellzyklusverlaufs ist für Untersuchungen in vielen wissenschaftlichen Bereichen unerlässlich. Der BrdU Chemiluminescent Cell Proliferation Assay Kit und der BrdU Cell Proliferation Assay Kit sind nicht-isotopische Enzymimmunoassays zur Quantifizierung der DNA-Synthese und Zellproliferation. Diese Kits beinhalten den Einbau von BrdU-Reagenz in Zellen, die in Mikrotiterplatten kultiviert werden, wobei die Zellschicht als feste Phase verwendet wird. Der resultierende Assay ist schnell, einfach durchzuführen und bei hohem Probendurchsatz anwendbar. Das BrdU Immunohistochemistry Kit ist ein histochemischer Färbekit zum Nachweis und zur Lokalisierung von Bromodeoxyuridin, das in neu synthetisierte DNA aktiv proliferierender Zellen eingebaut wird.
Das Tunel Assay Kit (Elabscience) ist eine hochempfindliche, schnelle und einfache Methode zum Nachweis von Zellapoptose. Nach der Biotin-dUTP-Markierung und DAB-Färbung kann die Zellapoptose unter gewöhnlicher Lichtmikroskopie nachgewiesen werden.
Unter DNA Damage ELISA Kits finden Sie weitere Enzyme-Immunosorbent-Assays für die quantitative Messung von DNA und RNA.
Caspasen können in drei Gruppen eingeteilt werden: Initiator-Caspasen (Caspase 2, 8, 9 und 10), Effektor-Caspasen (Caspase 3, 6 und 7) und inflammatorische Caspasen (Caspase 1, 4, 5, 11 und 12). Initiator-Caspasen spalten die Effektor-Caspasen, die für die Spaltung der zellulären Schlüsselproteine, wie z.B. Zytoskelettproteine, verantwortlich sind. Diese Zytoskeltettproteine führen zu den typischen morphologischen Veränderungen, die in Zellen in Apoptose beobachtet werden kann. Entzündliche Caspasen wirken nicht bei der Apoptose, sondern sind mit Immunantworten auf mikrobielle Pathogene verbunden und fördern die Pyroptose, eine andere Art des lytischen Zelltods, der mit der Sekretion der Entzündungszytokine verbunden ist.
Szabo-Scandic bietet eine breite Palette von Antikörpern, Proteinen und Kits für die Caspase-involvierte Forschung an. Die Caspase Inhibitor Screening Kits werden für das Screening von Caspase-Inhibitoren mit fluorometrischen Methoden verwendet.
Die Caspase 3 spaltet und aktiviert die Caspasen 6, 7 und 9. Es ist die vorherrschende Caspase, die an der Spaltung des Amyloid-beta-4A-Vorläuferproteins beteiligt ist, das mit dem neuronalen Tod bei Alzheimer-Erkrankung assoziiert ist. Caspase 6 wird von den Caspasen 7, 8 und 10 verarbeitet, und es wird angenommen, dass es als nachgeschaltetes Enzym in der Caspase-Aktivierungskaskade fungiert.
Das Protein p53 ist dafür bekannt, bei vielen Tumorarten als Tumorsuppressor zu wirken. P53 kann in Abhängigkeit von den physiologischen Umständen und dem Zelltyp einen Wachstumsstopp oder Apoptose induzieren. Szabo-Scandic kann Ihnen eine Vielzahl von p53-Antikörpern für Ihre Forschung zur Verfügung stellen.
GeneTex bietet Antibody Panels für die allgemeine Apoptose-Forschung einschließlich der wichtigsten Antikörper an.
Santa Cruz Biotechnology hat eine große Auswahl an Antikörper in verschiedenen Konjugationen für die Apoptose-Forschung, z.B. BCL-2-Antikörper, Bax-Antikörper, Ras-Antikörper, Rock-1-Antikörper oder AIF-Antikörper.
Nachweis-Kits und verwandte Reagenzien:
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Caspase 1 - Caspase 4 - Caspase 5 - Caspase 11 - Caspase 12 |
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Immer für Sie da
Gernot Ensinger, M.Sc.
Laurent Haze
